基因工程的操作程序可简单地概括为( )
A.限制性核酸内切酶的应用
B.分、切、接、转、筛
C.将重组体导入宿主细胞,筛出阳性细胞株
D.将载体和目的基因连接成重组体
E.载体和目的基因的分离
A.限制性核酸内切酶的应用
B.分、切、接、转、筛
C.将重组体导入宿主细胞,筛出阳性细胞株
D.将载体和目的基因连接成重组体
E.载体和目的基因的分离
第2题
A.核酸内切酶
B.T4连接酶
C.末端转移酶
D.核酸外切酶
E.碱性磷酸酶
第3题
第5题
tR为四环素抗性基因,P为启动子,T为终止子,ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRⅠ、BamHⅠ在内的多种酶的酶切位点。据图回答:
(1)将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用EcoRⅠ酶切,酶切产物用DNA连接酶进行连接后,其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有________、_______、_______三种。若要从这些连接产物中分离出重组质粒,需要对这些连接产物进行___________。
(2)用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是________;若接种到含青霉素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物有___________。
(3)目的基因表达时,RNA聚合酶识别和结合的位点是,其合成的产物是_____________。
(4)在上述实验中,为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接,酶切时应选用的酶是________________。
第7题
A.用限制性核酸内切酶EcoRI和连接酶构建重组质粒
B.用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织,将C基因导入细胞
C.在培养基中添加卡那霉素,筛选被转化的菊花细胞
D.用分子杂交方法检测C基因是否整合到菊花染色体上
第8题
A.同种限制性核酸内切酶产物之间的连接(黏性末端连接法)
B.产生相同末端结构的不同限制性酶切产物之间的连接
C.不同末端结构的片段之间的连接
D.平末端的DNA连接
E.随意连接