首页 > 大学本科> 理学> 生物科学类

网友您好，请在下方输入框内输入要搜索的题目：

请输入或粘贴题目内容搜题

搜题

拍照、语音搜题，请扫码下载APP

题目内容（请给出正确答案）

[主观题]

λYES（酵母一大肠杆菌穿梭载体)是构建cDNA文库的高效载体，这种载体是噬菌体基因组与一个在大肠杆菌和酵母中

λYES(酵母一大肠杆菌穿梭载体)是构建cDNA文库的高效载体，这种载体是噬菌体基因组与一个在大肠杆菌和酵母中都能复制的质粒巧妙结合而成，它兼有病毒和质粒载体的优点。cDNA被插入载体的质粒部分，然后它能在体外被包装入病毒颗粒中，包装起来的载体感染大肠杆菌的效率比质粒本身要高得多。一旦进入了大肠杆菌，λYES中的质粒序列能够被诱导重组出基因组，并进行独立复制，这就可以从质粒中分离出来，以便进行进一步的遗传操作。

为了最大限度地提高克隆效率，载体用只有一个切点的限制性内切核酸酶Xho Ⅰ(5'-C↓TCGAG)进行切割，然后在dTTP存在的情况下，同DNA聚合酶一起进行温育。将一种具有平末端的双链cDNA同一段含由两段寡聚核苷酸组成的双链寡聚核苷酸接头连接起来，这两段寡聚核苷酸的序列是：5'-CGAGATTTACC和5'-GGTAAATC，它们的5'端都是磷酸。然后将载体和cDNA混合并连接在一起。采用这种方法用2μg的载体和0.1μg的cDNA，构建了一个有4×10⁷个克隆的cDNA文库。问：

答案

查看答案

发布时间：2021-07-21

更多“λYES（酵母一大肠杆菌穿梭载体)是构建cDNA文库的高效载体，这种载体是噬菌体基因组与一个在大肠杆菌和酵母中”相关的问题

第1题

构建cDNA文库常用的载体是( )

A.黏性质粒

B.M13噬菌体

C.λ噬菌体

D.细菌人工染色体

E.酵母人工染色体

点击查看答案

第2题

作为载体的M13噬菌体( )

A.为双链DNA分子

B.能够作为克隆基因组文库的载体

C.为单链DNA分子

D.能够克隆大于10kb的DNA片段

E.能够作为克隆cDNA文库的载体

点击查看答案

第3题

下列哪种克隆载体对外源DNA的容载量最大？( )

A.质粒

B. 黏粒

C. 酵母人工染色体(YAc)

D. λ噬菌体

E. cDNA表达载体

点击查看答案

第4题

你在一种高效的克隆载体λYES（）后在dTTP存在下与DNA多聚酶一起孵育，一个制备好的钝端cDNA与一个双链寡核苷酸接头连接，这个接头由两个寡核苷酸5’-CGAGATTTACC和5’-GGTAAATC组成，其5’-末端均有磷酸基团，然后DNA和cDNA混匀并进行连接。这个方案证实非常有效，用2μg载体和0.1mg cDNA，你可以得到4×10 7 重组分子组成的文库

点击查看答案

第5题

原核生物大肠杆菌的克隆载体中，能够容纳最大的外源DNA片段的载体是_______，可容纳DNA片段大小为_

______；酵母质粒载体都是利用_______质粒与细菌质粒pBR322构建而成的，主要有_______、_______和_______3种。目前能容纳最大外源DNA片段的载体是_______。

点击查看答案

第6题

有关噬菌体的叙述错误的是（）。

A.常用作克隆载体的噬菌体有λ—噬菌体和M13噬菌体

B.λ噬菌体DNA改造成的载体有λgt系列和EMBL系列

C.λgt系列适用于插入型载体，用于cDNA克隆

D.EMBL系列适用于置换型载体，用于基因组DNA克隆

E.M13噬菌体基因间隔区插入了Ecoli的一段调节基因和LacZ的C端氨基酸编码基因

点击查看答案

第7题

下列属大容量载体的是（)。

A.pBR322

B.pUC19

C.M13噬菌体

D.柯斯质粒载体

E.酵母人工染色体载体

点击查看答案

第8题

宏基因组学中基因组技术的基本程序包括（)

A.宏基因组的提取，将DNA克隆到载体中

B.载体转化宿主细菌建立环境基因组文库

C.环境基因组文库分析和筛选

D.结果分析

点击查看答案

第9题

构建基因组文库和cDNA文库用的都是基因组DNA。（)

点击查看答案

第10题

假设你需要将一段cDNA克隆到表达载体中并转化到大肠杆菌中。cDNA的两端和载体上均有BamHⅠ的酶切位点，你需要

用BamHⅠ切割eDNA和载体然后将它们连接在一起。下面是实验方法要求的具体步骤：a．用BamHⅠ处理载体DNA，然后用碱性磷酸酶去除5'端的磷酸基；b．用BamHⅠ处理cDNA，然后与步骤a中得到的载体DNA混合，加入DNA聚合酶，在适当的条件下使cDNA与载体连接；C．将步骤b的产物转入大肠杆菌感受态细胞中，培养后均匀涂在含有抗生素的琼脂培养皿上。

因为表达载体中含有抗性基因，能表达抵制抗生素的酶，所以只有含有载体的大肠杆菌才可以在含有抗生素的培养皿上生长，而未被转化的细菌则因受到抗生素的抑制而死掉。

你还参照实验手册做了下面四组对照：

对照一、在含有抗生素的培养皿上面涂布未被转化的(即不含有载体的)大肠杆菌感受态细胞(cells alone)。

对照二、用未被酶切的载体直接转化大肠杆菌感受态细胞，将产物涂布在含有抗生素的培养皿上面(vector alone)。

对照三、用BamHI酶切载体DNA后，不用碱性磷酸酶处理，不需要cDNA，直接加入DNA聚合酶，然后转化、涂板(Omit phosphatase，omit eDNA)。

对照四、除使用碱性磷酸酶外，其它与对照三相同(Omit cDNA)。

你一共做了三次实验，在第一次中所有的平板中都长出很多细菌。在第二次实验中所有的平板中都没有长细菌。在第三次实验中你得到了较好的结果，转化成功，具体克隆数见下表：

Preparation of Sample		NO.of Colonies
1	2	3
Control 1	Ceils alone	TMTC	0	0
Control 2	Uneut vector	TMTC	0	＞1000
Control 3	Omit phosphatase，omit cDNA	TMTC	0	435
Control 4	Omit CDNA	TMTC	0	25
Experimental sample		TMTC	0	34
TMTC=too many to count

请回答下列问题：

点击查看答案

账号：尚未登录

登录没有账号？去注册

购买搜题卡

公需课题库全部 >

国开2023年春《职业生涯规划（1）》形考任务4试题及答案国开2023年春《职业生涯规划（1）》形考任务3试题及答案国开2023年春《职业生涯规划（1）》形考任务2试题及答案国开2023年春《职业生涯规划（1）》形考任务1试题及答案国开2023年春《学前儿童艺术教育(音乐)》（专科）形考任务4试题及答案国开2023年春《学前儿童艺术教育(音乐)》（专科）形考任务2试题及答案国开2023年春《水工钢筋混凝土结构》形考任务2试题及答案国开2023年春《水工钢筋混凝土结构》形考任务1试题及答案国开2023年春《组织行为学》（本科）形考任务1试题及答案国开2023年春《小城镇建设》（专科）形考任务4试题及答案

考试指南全部 >

2024辽宁凌源高考体检项目有哪项？2024年江苏省考研成绩公布时间及注意事项高考体检项目有哪项？2024朝阳如何快速查询上海大学考研成绩初试结果淄博市2024高考体检项目有哪项？河南考研成绩查询入口及注意事项 2024高考体检项目有哪项？青岛南华大学临床医学考研分数线趋势及分析山东省泰安市高考体检项目有哪项？2024 2024考研初试成绩查询在哪里？点击查看最新查询方式！

高考志愿助手全部 >

武汉纺织大学怎么样？学校简介中国地质大学（武汉）怎么样？学校简介华中科技大学怎么样？学校简介信阳艺术职业学院怎么样？学校简介河源职业技术学院特色专业建设点有哪些？开封文化艺术职业学院学校简称是什么？有哪些专业？郑州城建职业学院怎么样？学校简介上海财经大学浙江学院是985还是211大学？河南应用技术职业学院学校简称是什么？有哪些专业？阳江职业技术学院特色专业建设点有哪些？

下载APP

关注公众号

TOP