某同学在提取酶的过程中发现酶已经失活，一个原因是由于操作不当引起酶的变性。请问有哪些因素会引

起变性？还有什么因素可能引起失活？如果认为酶的失活不是由于变性引起的，请提出一种推测，并设计一个实验路线予以证明。